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可溶性大豆多糖的提取、鉴定及生物活性的研究

作　者: 张倩
导　师: 范远景
学　校: 合肥工业大学
专　业: 食品科学
关键词: 可溶性大豆多糖提取鉴定免疫调节
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

可溶性大豆多糖(Soluble Soybean Polysaccharides，SSPS)是一种从大豆中提取的水溶性多糖。可溶性大豆多糖是大豆中的有效活性成份之一，它可以被制成高浓度溶液，其溶液的粘度几乎不受盐类影响，对温度的热稳定性也优于其他糖类。SSPS有抗氧化性、分散性、稳定性、乳化性和黏着性等多种特性，不仅能用作强化食品的膳食纤维，还可以用于制药等工业中。本文对SSPS的提取工艺进行了研究，又在此基础上进一步的做了纯化与鉴定等相关研究工作。在SSPS的提取过程中，通过设置不同提取温度、保温时间、pH值、固液比这四个条件来测算SSPS的产率，并运用单因素实验确定正交实验的条件，得到最佳提取条件，即提取温度在100℃，保温时间为3小时，固液比1∶2，pH值为5。将最佳提取条件下得到的可溶性大豆多糖经纤维素DE-52柱层析纯化分离，其中用双蒸水洗脱得到最大洗脱峰，得到含量纯度约为70.58％的可溶性大豆多糖产品。将可溶性大豆多糖产品完全水解，与单糖标准品对比进行薄层层析(TLC)和傅立叶变换红外光谱分析(FTIR)，初步鉴定了在我们的实验条件下提取到的可溶性大豆多糖的主要成分为鼠李糖和半乳糖等单糖组分。研究表明多糖能对免疫系统发挥调节作用。本文采用动物实验，对本实验提取和制备得到的可溶性大豆多糖的免疫活性进行测定工作。通过对小鼠的脏器/体重比值，单核—巨噬细胞碳粒廓清功能及小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的测定，结果表明，灌胃高剂量的可溶性大豆多糖能有效提高小鼠免疫器官的脏器指数及腹腔巨噬细胞的吞噬能力。而在碳粒廓清实验中，中剂量组的吞噬指数最高。这可能是实验小鼠供体体重差异而造成的。从实验结果初步可以判断出在我们的实验条件下提取到的可溶性大豆多糖具有一定的免疫调节活性。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
致谢  7-12
第一章前言  12-21
  1.1 可溶性大豆多糖的结构  13
  1.2 可溶性大豆多糖的特性  13-14
    1.2.1 可溶性大豆多糖的物理性质  13-14
    1.2.2 可溶性大豆多糖作为食品添加剂的应用  14
  1.3 可溶性大豆多糖的生物学活性  14-17
    1.3.1 膳食纤维功能  14-15
    1.3.2 抗氧化性质  15
    1.3.3 免疫学活性及其应用  15-17
  1.4 免疫食品评价  17-19
    1.4.1 保健食品概述  17
    1.4.2 免疫调节功能食品  17-19
  1.5 本论文的立题意义和研究目的  19-21
    1.5.1 立题意义  19
    1.5.2 研究目的  19-21
第二章可溶性大豆多糖的提取及工艺优化研究  21-34
  2.1 材料  21-22
    2.1.1 原料  21
    2.1.2 主要仪器设备  21
    2.1.3 主要试剂  21-22
  2.2 可溶性大豆多糖的提取实验  22-23
    2.2.1 大豆豆渣的制备及透析袋的处理  22
    2.2.2 可溶性大豆多糖提取流程  22
    2.2.3 可溶性大豆多糖提取的单因素实验  22
    2.2.4 正交实验  22-23
    2.2.5 样品的初步纯化  23
    2.2.6 其他提取方法对比实验  23
  2.3 可溶性大豆多糖样品的检测方法  23-26
    2.3.1 总糖含量的测定:苯酚-硫酸法  23-24
    2.3.2 还原糖含量的测定:DNS法  24-25
    2.3.3 蛋白质含量测定:考马斯亮蓝G-250法  25-26
  2.4 标准曲线测定结果  26-28
    2.4.1 总糖含量的标准曲线  26-27
    2.4.2 还原糖含量的标准曲线  27
    2.4.3 蛋白质含量标准曲线  27-28
  2.5 提取的可溶性大豆多糖的测定结果  28-33
    2.5.1 单因素实验结果与分析  28-30
    2.5.2 正交实验结果与分析  30-33
    2.5.3 其他提取方法对比实验结果  33
  2.6 本章小结  33-34
第三章可溶性大豆多糖纯化及结构组成鉴定  34-41
  3.1 材料  34-35
    3.1.1 主要仪器设备  34
    3.1.2 主要试剂  34
    3.1.3 主要溶液配制  34-35
  3.2 方法  35-37
    3.2.1 纤维素DE-52柱层析纯化  35-36
    3.2.2 硅胶板薄层层析  36
    3.2.3 傅立叶变换红外光谱(FTIR)测定  36-37
  3.3 结果  37-40
    3.3.1 纤维素DE-52柱层析结果分析  37
    3.3.2 硅胶板薄层层析结果分析  37-38
    3.3.3 傅立叶变换红外光谱(FTIR)测定结果分析  38-40
  3.4 本章小结  40-41
第四章可溶性大豆多糖免疫活性测定实验  41-51
  4.1 材料  41-43
    4.1.1 主要仪器设备  41-42
    4.1.2 主要试剂  42
    4.1.3 主要溶液配制  42-43
  4.2 实验方法  43-47
    4.2.1 小鼠免疫器官脏器系数的测定  43-44
    4.2.2 小鼠碳粒廓清实验  44-46
    4.2.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血细胞实验(半体内法)  46-47
  4.3 实验结果与分析  47-50
    4.3.1 小鼠免疫器官脏器系数的测定结果  47-48
    4.3.2 小鼠碳粒廓清实验结果  48
    4.3.3 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验结果  48-50
  4.4 本章小结  50-51
第五章结论与展望  51-53
  5.1 主要结论  51
  5.2 展望  51-53
参考文献  53-58

可溶性大豆多糖的提取、鉴定及生物活性的研究

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