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兔卵巢组织移植后形态与功能的研究

作　者: 魏丽娜
导　师: 丁家桐
学　校: 扬州大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 兔卵巢组织自体移植异体移植玻璃化冷冻
分类号: R713
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 60次
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内容摘要

目的:本研究以兔为动物模型,研究卵巢组织的新鲜自体、异体移植以及冷冻自体移植后性激素的分泌和卵泡的生长发育情况。为人类临床应用提供技术支持和数据参考。方法:将35只母兔随机分成7组:Ⅰ组为阳性对照组;Ⅱ组为去势组;Ⅲ组为新鲜卵巢组织颈部皮下移植组;Ⅳ组为新鲜卵巢组织颈部皮下移植后补充外源性促性腺激素组;Ⅴ组为新鲜卵巢组织腹壁皮下移植组;Ⅵ组为冷冻卵巢组织颈部皮下移植组;Ⅶ组为新鲜卵巢组织同种异体颈部皮下移植组。手术之前及其后每周采血一次测定血浆雌二醇和孕酮浓度。术后第7周,取卵巢组织和子宫进行组织学研究,并称量子宫湿重。结果和结论:1卵巢组织移植后分泌的性激素浓度都显著的高于去势组(P<0.05)。子宫湿重也比去势组高,并且差异显著(P<0.05)。证明了母兔卵巢组织新鲜自体和异体移植以及冷冻后自体移植的可行性,卵巢组织可在母兔体内异位存活并生长。2移植部位不同对卵巢组织移植的效果有影响。颈部皮下移植组性激素浓度和子宫湿重都高于腹壁皮下移植组,但两者之间的差异不显著(P>0.05)。颈部皮下移植组与阳性对照组之间无显著差异(P>0.05),但腹壁皮下移植组与阳性对照组之间差异显著(P<0.05)。3卵巢移植后,给母兔补充外源性促性腺激素有利于卵巢组织的生长。该组的性激素浓度和子宫湿重与阳性对照组之间的差异最小,且差异不显著(P>0.05),与未补充外源促性腺激素的新鲜移植组之间的差异不显著(P>0.05)。4首次用玻璃化冷冻法保存母兔卵巢组织后自体移植,卵巢组织恢复了内分泌功能。冷冻组的性激素浓度显著低于新鲜自体移植组和阳性对照组(P<0.05),但显著的高于去势组(P<0.05)。子宫湿重的结果与性激素浓度的结果一致。5在不使用免疫抑制剂的情况下,异体皮下移植的母兔卵巢组织可以存活,异体移植组子宫湿重、性激素浓度都显著低于阳性对照组和其它试验组(P<0.05),但都显著高于去势组(P<0.05)。

全文目录

中文摘要  2-4
英文摘要  4-9
前言  9-18
  1 卵巢移植的背景  9
  2 卵巢移植研究进展  9-14
    2.1 自体移植  10-11
    2.2 同种异体移植  11
    2.3 异种异体移植  11-12
    2.4 影响卵巢组织成活率的因素  12-14
      2.4.1 卵巢组织的缺血-再灌注损伤  12-13
      2.4.2 移植后的血管重建  13
      2.4.3 垂体促性腺激素  13
      2.4.4 移植部位的选择  13-14
      2.4.5 移植时的温度  14
  3 卵巢组织的冷冻保存  14-16
    3.1 卵巢组织冷冻保存的可行性  14-15
    3.2 影响卵巢组织冷冻保存效果的因素  15-16
      3.2.1 冷冻损伤  15
      3.2.2 冷冻保护剂的毒性作用  15-16
      3.2.3 冷冻方法  16
  4 本研究的目的和意义  16-18
材料方法  18-23
  1 试验材料  18-20
    1.1 实验动物  18
    1.2 主要试剂  18
    1.3 主要仪器  18-19
    1.4 操作液配方  19-20
      1.4.1 卵巢组织冲洗液  19
      1.4.2 卵巢组织培养液  19
      1.4.3 卵巢组织冷冻液、解冻液  19-20
  2 试验方法  20-22
    2.1 分组  20
    2.2 手术方法  20-21
      2.2.1 麻醉  20
      2.2.2 去势手术  20
      2.2.3 卵巢组织的获取  20
      2.2.4 自体移植  20-21
      2.2.5 异体移植  21
      2.2.6 术后处理  21
    2.3 冷冻保存方法  21-22
      2.3.1 玻璃化冷冻过程  21
      2.3.2 解冻过程  21-22
    2.4 指标测定  22
      2.4.1 子宫湿重的称量  22
      2.4.2 血浆雌二醇（E_2）和孕酮（P_4）浓度测定  22
      2.4.3 卵巢组织切片制作  22
  3 统计分析  22-23
结果  23-31
  1 母兔子宫湿重的变化  23
  2 母兔性激素浓度的变化  23-29
    2.1 E_2 浓度的变化  23-26
    2.2 P_4 浓度的变化  26-29
  3 组织学观察  29-31
    3.1 卵巢组织的组织学观察  29-30
      3.1.1 正常的卵巢组织  29
      3.1.2 移植后的卵巢组织  29-30
    3.2 子宫内膜的组织学观察  30-31
讨论  31-37
  1 移植后卵巢组织的功能  31-32
  2 移植部位对移植效果的影响  32
  3 外源促性腺激素对移植效果的影响  32-33
  4 卵巢组织冷冻后移植的效果  33-34
  5 同种异体移植的效果  34-37
结论  37-38
参考文献  38-45
附录  45-49
致谢  49-50
攻读学位期间发表的论文  50

兔卵巢组织移植后形态与功能的研究

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