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维药罗勒有效部位在体外对细胞内COX-1和COX-2活性的影响

作　者: 何志琴
导　师: 依巴代提·吐乎提
学　校: 新疆医科大学
专　业: 药理学
关键词: 罗勒抗血栓环氧化酶有效部位
分类号: R29
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:前期研究发现罗勒提取物能显著降低血浆TXA2的浓度,在此基础上,探讨维药罗勒不同极性提取部位在体外对COX-1和COX-2活性的影响,进而找出该药抗血栓的作用机制及其有效部位。方法:①采用MTT比色法检测相对细胞活力,筛选出最佳的细胞铺板密度及给药浓度,并通过检测罗勒5个提取部位分别对ECV304细胞和RAW264.7细胞的毒性作用,求出各部位药的IC50值,进而确定给药剂量。②将罗勒不同提取部位分别对ECV304细胞和脂多糖诱导的RAW264.7细胞进行不同时间的药物干预,采用ELISA法测定细胞上清液中6-keto-PGF1α或PGE2的浓度,并计算其抑制率。结果:①两种细胞的最佳铺板密度均为1×105个/ml,OBL-石油醚,OBL-氯仿,OBL-醋酸乙酯,OBL-正丁醇、OBL-乙醇的IC50值分别为62.4,29.3,84.8,258,320μg/ml;对RAW264.7细胞的最大给药浓度依次为35,7.5,25,80,100μg/ml;对ECV304细胞的最大给药浓度依次为50,7.5,50,10,100μg/ml。②各提取部位在不同时间内均对PGE2有抑制作用,其中OBL-醋酸乙酯和OBL-正丁醇对其作用较大,最大抑制率在短时间内分别为53.95%、46.02%;在长时间内分别为53.93%、53.41%。各提取部位在不同时间内对6-keto-PGF1α的浓度有不同的影响,其中,OBL-正丁醇和OBL-乙醇在短时间内对其有显著性地增加作用,在1 h干预的抑制率分别为-56.85%、-98.17%,在4 h干预的抑制率分别为-48.72%、-50.20%;长时间内,OBL-醋酸乙酯对其的最大抑制率为19.68%,而OBL-氯仿和OBL-正丁醇能显著性地增加6-keto-PGF1α的浓度,最小抑制率分别为-33.79%和-38.71%。结论:维药罗勒可能通过抑制TXA2合成酶的活性,直接激活COX-1的酶活性,最终维持TXA2-PGI2的平衡而产生抗血栓作用,还可能通过直接抑制COX-2的酶活性,进而抑制炎性介质PGE2的生物合成而产生抗血栓的作用。醋酸乙酯及正丁醇提取部位是其发挥该作用的有效部位。

全文目录

摘要  7-8
ABSTRACT  8-9
前言  9-11
材料与方法  11-18
  1.材料  11-12
  2.方法  12-18
    2.1 罗勒的提取分离  12
    2.2 细胞培养  12-13
    2.3 MTT 法确定细胞铺板密度及各药物浓度  13-14
    2.4 罗勒不同部位的不同时间干预对 COX-2 活性的影响  14-15
    2.5 罗勒不同部位的不同时间干预对 COX-1 活性的影响  15
    2.6 数据处理  15-18
结果  18-27
讨论  27-32
小结  32-33
致谢  33-34
参考文献  34-37
综述  37-48
攻读硕士学位期间发表的学术论文  48-49
导师评阅表  49

维药罗勒有效部位在体外对细胞内COX-1和COX-2活性的影响

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