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地黄饮子对Aβ_（25-35）诱导PC12细胞损伤氧化应激及Ca~（2+）通道的影响

作　者: 于淼
导　师: 谢宁
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医基础理论
关键词: 地黄饮子老年性痴呆 Aβ25-35
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:本课题通过建立Aβ损伤的PC12细胞模型,运用生物化学和激光共聚焦技术,试图分析Aβ与AD发生、发展的密切关系及相关机制,探讨地黄饮子防治AD的作用机理。方法:离体培养的PC12细胞分为6组:空白对照组、模型组、对照组、安理申组、地黄饮子低剂量组、地黄饮子中剂量组、地黄饮子高剂量组。待细胞进入对数生长期后吸去培养液,分别加入空白培养液10%、正常脑脊液10%、安理申脑脊液10%、中药脑脊液低剂量5%、中剂量10%、高剂量20%,加培养液补至等量, 37℃孵育2h。然后除空白组之外的各组加入4μL经老化处理的Aβ25-35 (终浓度为10μmol/L),建立AD细胞模型,空白组加入等量的培养液,继续孵育24h。然后收集培养液、离心细胞。对培养液进行MTT法和LDH的检测细胞生存活力;检测各组PC12细胞培养液中MDA、SOD、CAT、GSH-Px的含量;激光共聚焦法检测各组PC12细胞内钙离子与荧光探针结合后的荧光强度。结果:一、地黄饮子能增强MTT代谢,减少LDH释放,改善Aβ25-35损伤后的PC12细胞生存状态,提高细胞生存活力;二、地黄饮子能降低Aβ25-35损伤PC12细胞培养液中的MDA含量,提高PC12细胞培养液中SOD的活性、提高CAT、GSH-Px的含量即抗氧化酶活性,提高自由基清除能力,减少自由基对PC12细胞的损伤;三、地黄饮子能抑制Aβ25-35损伤PC12细胞所致的钙超载现象,保护细胞膜结构;四、地黄饮子可能通过对细胞膜的保护作用,减少自由基对神经细胞的损害,进而提高细胞生存活力。结论:地黄饮子可能通过抑制Aβ25-35损伤的PC12细胞所致的钙超载现象,减少LDH释放,改善细胞状态,进而提高抗氧化酶活性,增强自由基清除能力,减少自由基对神经细胞的损害,使细胞生存活力增强。

地黄饮子对Aβ_（25-35）诱导PC12细胞损伤氧化应激及Ca~（2+）通道的影响

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