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急性肺栓塞大鼠肝细胞生长因子的变化

作　者: 于养生
导　师: 阳跃忠
学　校: 桂林医学院
专　业: 内科学
关键词: 急性肺栓塞大鼠肝细胞生长因子动物模型
分类号: R563.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 9次
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内容摘要

目的本实验采用自体血栓回输法建立急性肺栓塞（acute pulmonary embolism APE）大鼠模型,固相夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）含量,免疫组化法观察HGF在肺组织中的表达水平,通过检测肺栓塞后血浆HGF含量及肺组织中HGF的表达水平,观察HGF变化趋势,研究HGF对于肺栓塞的诊断价值,并初步探讨HGF在肺栓塞时升高的机制。方法32只健康成年SD大鼠（雌雄不限）随机分为2组:血浆HGF检测组（16只）和组织HGF检测组（16只）。每组又可分为对照组和实验组各8只大鼠。实验组即模型组,采用自体血栓回输法建立肺栓塞模型,在无菌条件下断尾取血1 mL,置于无菌导管中,室温下静置25～30 min,70℃水浴10 min,形成牢固血栓。在超声下将4F鞘管扩张管插入右心房或接近右心房的下腔静脉处,将预制栓子通过鞘管扩张管分次注入,直至大鼠出现呼吸浅快、躁动不安、喘憋、口唇及耳朵发绀等缺氧症状,心率较术前增加30次/min左右,提示造模成功,停止继续注入。对照组即假手术组,以与自体血栓等量生理盐水注入。血浆HGF检测组,在造模成功后0、1、6、12、24、48小时,六个时间点采集血样,ELISA法检测血浆HGF含量,并观察HGF的变化趋势;组织HGF检测组,在造模成功后12h处死大鼠,取肺、肝和肠组织,10%福尔马林固定,石蜡包埋后,行HE染色,镜下寻找栓子,验证造模成功,并用免疫组化法检测HGF蛋白在肺组织中的表达,同时观察肝和肠组织有无血栓。结果血浆实验组和组织实验组分别有1只和2只大鼠死亡,其他实验组大鼠肺动脉可见栓子,肝、肠组织未发现梗死现象,显示造模成功。实验组血浆HGF在造模后1 h开始升高,12 h达到高峰,48 h后下降至接近正常,实验组与对照组比较,造模1、6、12和24h血浆HGF差异有统计学意义（P<0.05）;急性肺栓塞肺组织中HGF蛋白表达以阳性面积率表示,组织对照组为（0.88±0.26）×10^-2,组织实验组为（3.49±0.56）×10^-2,两者差异有统计学意义（P<0.01）。结论急性肺栓塞时HGF明显升高,并于12h左右达到高峰;HGF有望作为一种新的生物学标记物用于急性肺栓塞早期诊断。

全文目录

中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
符号说明  9-10
前言  10-12
急性肺栓塞大鼠肝细胞生长因子的变化  12-32
  1 材料与方法  12-18
  2 结果  18-23
  3 讨论  23-27
  4 结论  27-28
  参考文献  28-32
综述  32-52
  参考文献  45-52
致谢  52-53
攻读学位期间发表的学术论文目录  53

急性肺栓塞大鼠肝细胞生长因子的变化

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