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蛋白酶活化受体1在鼻咽癌细胞中的表达及其意义

作　者: 朱庆尧
导　师: 王涛
学　校: 华中科技大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 鼻咽肿瘤蛋白酶活化受体-1 凝血酶基质金属蛋白酶明胶酶潜伏膜蛋白-1 侵袭转移
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 13次
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内容摘要

目的:检测蛋白酶活化受体1 (PAR1)在鼻咽癌细胞中的表达,研究其在鼻咽癌细胞增殖、黏附和侵袭等恶性生物学行为中的作用。方法:选取5株有代表性的鼻咽癌细胞系,其中CNE1为高分化细胞系,CNE1-LMP1为稳定转染潜伏膜蛋1 (LMP1)基因的细胞系,其已被证实比CNE1细胞系更具侵袭性和转移性,CNE2为低分化细胞系,SUNE1-5-8F为高成瘤高转移细胞系,而SUNE1-6-10B为只成瘤不转移细胞系,Real time PCR和Western blot检测5株鼻咽癌细胞系中PAR1 mRNA和蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测PAR1在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位;MTT、黏附实验和Transwell侵袭实验分别用来检测PAR1特异性激动肽SFLLRN和凝血酶对CNE1-LMP1细胞增殖、黏附和体外侵袭的影响;明胶酶谱法检测SFLLRN和凝血酶对CNE1-LMP1细胞培养上清液中MMP2和MMP9活性的影响。结果:PAR1在5株鼻咽癌细胞系中都存在表达,其主要分布在细胞膜和细胞浆, CNE1-LMP1和SUNE1-5-8F中PAR1的表达量明显多于CNE1、CNE2和SUNE1-6-10B,而CNE1-LMP1细胞中PAR1的表达量为5株细胞中最多一株。SFLLRN能够促进CNE1-LMP1细胞增殖、黏附和体外侵袭。凝血酶亦能提高CNE1-LMP1细胞的黏附和体外侵袭能力,但其对细胞的增殖起双重作用,0.1~0.5U/ml的凝血酶能够促进细胞的增殖,而高于0.5U/ml的凝血酶则抑制细胞的增殖。CNE1-LMP1细胞同凝血酶共孵育24小时,其细胞培养上清液中MMP2和MMP9的活性明显升高;与凝血酶相比,SFLLRN仅能够轻微地上调CNE1-LMP1细胞中MMP2的活性,而对MMP9的活性影响甚微。结论:PAR1在鼻咽癌细胞中的表达与鼻咽癌细胞的侵袭转移潜能相关;PAR1的活化能够提高鼻咽癌细胞的增殖、黏附和侵袭能力,并在一定程度上促进细胞明胶酶的分泌。

全文目录

中英文对照缩略词  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-11
材料与方法  11-23
结果  23-29
讨论  29-33
结论  33-34
参考文献  34-38
综述蛋白酶活化受体1在恶性肿瘤侵袭转移中的作用  38-56
  参考文献  48-56
附录攻读学位期间发表论文目录  56-57
致谢  57-58

蛋白酶活化受体1在鼻咽癌细胞中的表达及其意义

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