学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
重复序列标记用于鉴别病理混淆标本的研究
作 者: 陶汉杰
导 师: 马韵
学 校: 广西医科大学
专 业: 病理学
关键词: 混淆标本 个体识别 短串联重复
分类号: R446.8
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 14次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
研究目的:①筛选适用于鉴别病理混淆标本的目的基因;②建立检测目的基因的实验方法。研究方法:①收集60例结肠癌病人的手术切除标本及外周血标本,用改良的酚-氯仿抽提法提取外周血DNA,用改良的蛋白酶K消化、酚-氯仿抽提法提取相应病人的福尔马林固定、石蜡包埋组织DNA,分别对目的基因进行扩增,扩增产物用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测;②对同一患者标本分别经福尔马林固定12、36、60 h,比较目的基因分别在它们中的PCR扩增结果;对同一石蜡包埋组织分别用蛋白酶K经37℃消化12h和56℃消化3h,再提取DNA进行扩增,比较不同消化条件下所提取DNA的PCR扩增结果。③改变PCR反应体系和反应条件,观察其对PCR扩增效果的影响。研究结果:①初步筛选出2个目的基因D1S80和vWA,受检外周血标本中D1S80和vWA的扩增成功率分别为100%(30/30例)和90%(27/30例),而在相对应的石蜡包埋组织中的扩增成功率分别为0(0/10例)和46.7%(14/30例),在组织DNA中,两位点扩增的总的成功率分别为0(0/45份标本)和29.7%(46/155份标本)。②组织标本分别经福尔马林固定12、36和60h后所提取的DNA,在vWA位点的扩增结果差别无显著意义(P值>0.05);用37℃消化12h和56℃消化3h两种条件提取石蜡包埋组织DNA,对vWA位点的PCR扩增结果差别亦无显著意义(P值>0.05);增加镁离子浓度可以提高vWA位点在石蜡包埋组织中的扩增效果。③消化道恶性肿瘤组织存在vWA位点的杂和性缺失,缺失率为21.4% (3/14例)。结论:①通过扩增不同标本组织中短串联重复序列并进行比较,在10~12h内,可以把经福尔马林固定的混淆标本区分开来;②采用一般方法从福尔马林固定组织中提取的DNA片断长度约在400bp左右,故应选择扩增长度较短的目的基因用于区分实验。在重复序列标记中,目的基因的扩增片段越小,在石蜡包埋组织中扩增的成功率就越高。vWA位点适用于病理科混淆标本的鉴定,但其扩增效率还有待于进一步提高。③vWA在消化道恶性肿瘤组织中存在一定突变率,可能导致鉴别错误。
|
全文目录
一、重复序列标记用于鉴别病理混淆标本的研究 3-31 英汉缩略对照 3-4 中文摘要 4-5 英文摘要 5-7 前言 7-8 材料与方法 8-15 结果 15-21 讨论 21-27 结论 27-28 参考文献 28-31 二、病理科混淆标本鉴别方法的研究进展 31-42 正文 31-39 参考文献 39-42 三、致谢 42
|
相似论文
- 12个STR基因座在四个品种犬中的遗传多样性分析及其在个体识别中的应用,S829.2
- 慢性阻塞性肺病血液生化和免疫学指标的变化及其与DNA短串联重复序列的关联,R563.9
- 建立LCM分离精子细胞的DNA检测方法及其法医学应用,D919
- 河南汉族人群15个STR基因座遗传多态性及潮汕人的中原汉族起源,D919
- 应用STR多态性进行同胞鉴定4例,R394
- 应用STR-PCR技术快速诊断21三体综合征,R714.5
- 孕妇血浆中游离胎儿DNA的检测与分析,R714.5
- QF-PCR扩增D18S53、D18S59及D18S4883个STR基因座产前诊断ES,R714.5
- 2型糖尿病患者血浆VLCPUFA水平变化及其与NF-κB基因多态性的关系,R587.1
- 非CODIS系统8个STR基因座荧光分型体系的构建及法医学应用,D919
- 中国汉族男性四肢长骨推断身高的研究,D919
- 临床毛细管电泳的研究,O658.9
- 血友病B及血管性血友病分子发病机制研究,R554.1
- 异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞和粒细胞嵌合体的检测及其临床意义的研究,R733.7
- 湖北土家族15个STR基因座遗传多态性研究,R394
- 直接测序方法研究浙江汉族人群MICA基因遗传多态性,R450
- 荧光定量PCR快速诊断21-三体综合征及18-三体综合征,R714.5
- 四个STR基因座荧光标记复合扩增的研究及其法医学应用,D919
- CODIS系统三个miniSTR荧光标记复合扩增的构建及法医学应用,D919
- STR在同胞鉴定中的应用及河南汉族7个Y-STR遗传多态性,R394
中图分类: > 医药、卫生 > 临床医学 > 诊断学 > 实验室诊断 > 组织学检验
© 2012 www.xueweilunwen.com
|