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拟南芥中一个SAUR基因的功能研究
作 者: 朱宇斌
导 师: 王君晖
学 校: 浙江大学
专 业: 遗传学
关键词: 拟南芥 生长素 SAUR 静止中心 油菜素内酯
分类号: Q943.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
生长素(auxin)是最早被发现的一类植物激素,调控许多植物的生长和发育过程,包括胚胎的形成,脉管的分化,器官形成,向性运动和根系构造的形成。至少在某种程度上来说,生长素的功能主要通过一系列早期生长素响应基因来调节:Aux/IAAs,GH3s和Small auxin-up RNAs (SA URs)。这些基因在生长素处理后能够快速的表达积聚。在拟南芥中SAUR基因家族一共有72个成员。但是,它们的功能都还尚未弄清。因此弄清SAURs对于植物体生理发育的作用有着重要的意义。本研究中,我们主要通过分子生物学和转基因技术研究了atSAUR41基因(At1g16510)的相关功能。我们通过GateWay体系构建了SAUR41的过量表达载体和蛋白融合载体。通过观察,我们发现转基因小苗根系比野生型发达,主根向地性弱,侧根多,子叶偏大,下胚轴长。对此我们猜测SAUR41基因影响了生长素在根尖的运输,且还有可能涉及到油菜素内酯;用荧光显微镜观察了融合蛋白在转基因拟南芥中的的荧光信号,发现SAUR41蛋白主要在细胞质中表达,是细胞质蛋白。为了弄清SAUR到底对生长素有什么影响,我们构建了不同启动子驱动SAUR41的分析载体。通过对转基因小苗中生长素的分布以及表型的统计比较,我们可以推测,SAUR的表达确实对生长素的分布有影响,至于如何影响还有待下一步的研究。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-8 第1章 文献综述 8-18 1.1 生长素在植物生长发育过程中的作用 8-9 1.2 生长素信号转导 9-14 1.2.1 早期响应基因 9-11 1.2.2 ARFs 11-12 1.2.3 SCF~(TIR1) 12 1.2.4 信号转导模式 12-14 1.3 生长素的极性运输 14-16 1.3.1 运输的特点 14 1.3.2 生长素运输载体 14-16 1.4 总结 16-18 第2章 实验材料与方法 18-30 2.1 实验材料 18-19 2.1.1 实验对象 18 2.1.2 主要载体与菌株 18 2.1.3 工具酶 18 2.1.4 试剂与培养基 18-19 2.1.5 实验仪器 19 2.2 实验方法 19-30 2.2.1 SAUR-pEntry的构建 19-24 2.2.2 表达载体的构建 24-25 2.2.3 农杆菌转化转基因 25-26 2.2.4 不同的启动子驱动SAUR基因的分析载体构建 26-28 2.2.5 表型观察 28-30 第3章 结果与分析 30-42 3.1 ENTRY载体的构建 30-31 3.2 SAUR基因的过表达和亚细胞定位 31-37 3.2.1 表达载体的构建 31-33 3.2.2 表型观察分析 33-37 3.3 不同启动子分析SAUR 37-42 3.3.1 分析载体的构建 37-39 3.3.2 表型观察分析 39-42 第4章 讨论 42-47 4.1 SAUR与静止中心 42-43 4.2 SAUR与油菜素内酯 43-44 4.3 启动子分析 44-45 4.4 AT4G34770和AT5G18010 45-46 4.5 总结展望 46-47 参考文献 47-54 致谢 54-55 附录 55-57 已发表文章 57
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中图分类: > 生物科学 > 植物学 > 植物细胞遗传学 > 植物基因工程
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